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发布时间:2022-09-08 00:14:00 作者:乾芸仪器科技
培养容器应该以什么速度旋转?
这取决于细胞聚合体的直径。当容器转动时,细胞聚合体加速,直到他们到达沉积速度,而该速度取决于细胞聚合体的大小。根据斯托克斯方程,沉降速率随着细胞聚合体半径的平方而增加。因此,随着聚合体体积上的增加,它们沉降的更迅速,同时为了防止细胞聚合体与培养壁的碰撞有必要增加旋转速度。因此,一开始可能以慢速旋转培养,例如7rpm,当细胞聚合体在体积上增长并且变得可见,再增加旋转的速度。
颠覆传统的细胞培养系统RCCS-3D三维动态培养系统
颠覆传统的细胞培养系统RCCS-3D三维动态培养系统
RCCS 是一种颠覆传统的三度空间微重力培养系统。其利用培养盘或培养管柱进行培养,将培养液、细胞或组织一起加入培养盘或培养管柱中,并去除所有气泡。培养盘或培养管柱安装于具旋转马达之基座上,内部组织、细胞或细胞团块因旋转切线力量及重力双重影响下而保持悬浮状态。随着细胞或组织成长,旋转速度可做调整,细胞形成团块之后,必须提高转速使其 不会沉降而碰触底部。旋转的目的是要让所有细胞均匀交换养分和气体,并且细胞和细胞之间可有足够的接触,有利于细胞聚集。另外,不论是培养盘或培养管柱背侧均具备硅胶制成的换气膜以利进行1气体交换,使细胞/ 组织得到充分氧气及排除代谢后的废气。
细胞周期检测技术
细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程,所需的时间叫细胞周期时间。
常用的方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法。
细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL。
细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验
其他实验
细胞程度:软琼脂实验
细胞屏障:跨膜电阻、荧光黄透过率
细胞粘附实验
共培养实验
裸鼠成瘤实验
细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,而洗刷消毒在另一室。还有细胞培养的温度,和合适的气体环境。细胞操作主要是无菌,一旦被什么都做不了。
⑴超净工作台:也称净化工作台,分为侧流式,直流式和外流式三大类;
⑵无菌操作间:一般由更衣间,缓冲间和操作间三部分组成.操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱,离心机,倒置显微镜等.缓冲间可放置电冰箱,冷藏器及消毒好的无菌物品等;
⑶操作间:普通培养箱,离心机,水浴锅,定时钟,普通天平及日常分析处理物 ;
⑷洗刷消毒间:烤箱,消毒锅,蒸馏水处理器及酸缸等.;
⑸分析间:显微镜,计算机及打印机等。
硬件是实验成功的基础,细胞培养的设备及环境,十分重要!
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